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新型二代羊水培養基的檢驗方法

發布日期: 2020-08-27
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新型二代羊水培養基的檢驗方法:

采用如下方法做羊水細胞原位培養或按其它常規羊水細胞培養方法培養羊水細胞:

1、取羊水20ml, 以120xg離心十分鐘。


2、在無菌操作臺操作,棄上清液。


3、加入2ml羊水培養基,輕輕 混勻,制成細胞懸液。


4、取35mm培養皿,在蓋子上面及下半部側壁都做好標記(包括編號、姓名、日期等)。


5、滴加0.5ml細胞懸液至培養皿中的專用蓋玻片(25px2)中央,用移液管尖小心攤開。注意液體不能流出蓋玻片。


6、將培養皿置于5% CO2、濕度飽和的37度培養箱進行培養。


7、24小時后,給每塊蓋玻片補加1.5ml培養基。


8、接種7天后觀察細胞。當發現蓋玻片上細胞克隆數大于10個,每個克隆細胞數大于300且克隆邊沿細胞呈旺盛分裂狀態時,即可收獲細胞。否則,繼續培養1~2天。當克隆邊沿細胞融合度大于90%,呈現停止分裂狀態時,意味細胞已經老化,不適合用作分析。


9、適合收獲的細胞按常規方法使細胞分裂停止在有絲分裂中期并制作細胞片,經吉姆薩染色處理后做染色體核型分析。


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